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        ATP結合蛋白家族6抗體說明,Anti-ABCB6

        時間:2013-2-25閱讀:340
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        ATP結合蛋白家族6抗體說明,Anti-ABCB6

        免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機體體液免疫的水平,并進一步代表著B細胞的功能,因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。
        隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為*的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數采用二步法以上相結合的方法,特別是以硫酸銨提純為基礎,再經過層析柱的方法來提高免疫球蛋白及其各成分的純度zui為常用。
        硫酸銨溶液能使蛋白質膠體脫水并中和其電荷而使之沉淀下來(稱為鹽析)。不同濃度的硫酸銨鹽析蛋白成分不同,利用這一原理提取所需的免疫球蛋白成分。鹽析只能粗提,為了獲得純化的免疫球蛋白成分,必須進一步采用層析的方法進行分離。
        免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。

        IgG的分離與提純(一)材料與試劑配制 ATP結合蛋白家族6抗體說明,Anti-ABCB6 
        1.動物血清
        2.硫酸銨飽和溶液
        硫酸銨            800g~850g

        H2O               1 000ml
        加熱至絕大部分溶質溶解為止,趁熱過濾,置室溫過夜,然后以28%NH4OH調pH至7.0(不調pH值也可以)。
        注:硫酸銨以質量優者為佳,因次品中含有少量重金屬對蛋白質巰基有影響。如次品必須除去重金屬,可在溶液中通入H2S,靜置過夜后濾過,加熱蒸發H2S即可。
        3.0.01Mol/L pH7.4PB液
        A液:0.10Mol/L NaH2PO4液
        NaH2PO4•2H2O        15.60g
        加H2O至            1 000.ml
        B液:0.10Mol/L Na2HPO4液
        Na2HPO4•12H2O        35.80g
        加H2O至              1 000ml
        取A液19ml,B液81ml加水至1 000ml即可。
        4.1%BaCl2溶液
        5.納氏液
        HgI           115.00g
        KI            80.00g
        加H2O至    500.00ml
        溶化后過濾,然后再加20%NaOH500.00ml,混合即可。
        6.0.50 Mol/L的HCl液和0.50 Mol/L的NaOH液。
        7.洗脫液:0.03Mol/L的NaCl液。
        8.透析袋(或玻璃紙)。

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