抗核心蛋白聚糖抗體說明書，DCN抗體價格

對貼壁細胞：

    4.1轉染前，吸棄培養基，用1ml無菌siRNA轉染培養基洗細胞一次，棄培養基。

4.2在洗過的細胞上，鋪稀釋的siRNA-siRNA轉染試劑混合物，37度，5-7小時

4.3孵育后，向含有轉染細胞的每個孔中加0.4ml 生長培養基，其中的血清和抗生素濃度是正常濃度的兩倍，無需去除轉染混合物。如果，毒性是個問題的話，去除轉染混合物，以正常生長培養基代替。再孵育18-24小時

4.4孵育結束后，用新鮮正常生長培養基替換，繼續孵育24-72小時

4.5從細胞中吸棄培養基，用1ml 1*PBS洗細胞一次，然后丟棄

4.6放置在冰上，向孔中加入300ul 1*電泳緩沖液，用移液器吹打，混勻。（注意：混合物可能變得粘稠）

如果進行Western blot的話，轉移混合物到15ml的錐形管中，放在冰上，對混合物進行超聲波降解，每15秒一次，用輸出功率的40%。如果，超聲后，起很多泡泡，1000轉/秒，離心3分鐘，然后，按照western blot的方法進行電泳，免疫印跡。

如果做轉錄分析，按照我們的半定量RT-PCR的操作進行。

抗核心蛋白聚糖抗體說明書，DCN抗體價格對懸浮細胞

4.1在轉染前，1000轉/秒， 離心5分鐘收集細胞。去除培養基，用1ml 無菌的siRNA轉染培養基 。

4.2 再次離心1000轉/秒，5分鐘，去除培養基。用稀釋的siRNA-siRNA轉染試劑復合物重懸細胞。轉移細胞到12孔組織培養板，37°C孵育5-7小時，每次單獨轉染時重復。

4.3孵育后，加0.4ml含2倍正常血清和抗生物濃度的生長培養基到每個含被轉染細胞的孔中，不要去除轉染混合物。如果有毒性的話，去除轉染混合物，代替以正常生長培養基，在額外孵育18-24小時。

4.4一旦孵育結束，離心細胞，去除培養基。用新鮮的正常生長培養基重懸細胞。轉移細胞到12孔組織培養板，繼續孵育24-72小時。

如果  需要做western blot分析，則繼續以下步驟

轉移混合物到15ml的錐形管中。將2*電泳上樣緩沖液用Milli-Q超純水稀釋到1* 。1000轉離心5分鐘，收集細胞，去除培養基，用1ml PBS洗細胞，重復一次，用300ul 1*電泳上樣緩沖液重懸細胞，放在冰上，對混合物進行超聲波降解，每15秒一次，用輸出功率的40%。如果，超聲后，起很多泡泡，1000轉/秒，離心3分鐘，然后，按照western blot的方法進行電泳，免疫印跡。

如果需要轉錄分析，參照半定量RT-PCR步驟。