1. 液體培養基貯存于4 oC 冰箱，避免光照，實驗進行前放在37 oC 水槽中溫熱。
2. 液體培養基（加血清） 存放期為六個月，期間glutamine 可能會分解，若細胞生長不佳， 可以再添加適量glutamine。
3. 粉末培養基配制（以1 升為例）：
3.1. 細胞培養基通常須添加10 % 血清，因此粉末培養基之配制體積為900 ml，pH 為7.2 - 7.4。NaHCO3 為另外添加，若將NaHCO3 粉末直接加入液體培養基中會造成pH 之誤差，或局部過堿。因此粉末培養基及NaHCO3 粉末應分別溶解后才混合，然后用CO2 氣體調整pH，而非用強酸（HCl）或強堿（NaOH），因為氯離子對細胞生長可能有影響，且貯存時培養基的pH 易發生改變。
3.2. 材料：
3.2.1. 純水（milli-Q 水或二次至三次蒸餾水，水品質非常重要）
3.2.2. 粉末培養基
3.2.3. NaHCO3 （Sigma S-4019）
3.2.4. 電磁攪拌器
3.2.5. 無菌血清瓶
3.2.6. 0.1 或0.2 mm無菌過濾膜
3.2.7. pH meter
3.2.8. 真空幫浦
3.2.9. CO2 氣體
3.3. 步驟：
3.3.1. 取粉末培養基溶于700 ml milli-Q 水中，攪拌使其溶解。
3.3.2. 稱取適量之NaHCO3 粉末（數量依培養基種類而異，表一）溶于200ml milli-Q 水中，攪拌使其溶解，然后通入CO2 氣體至飽和，約3-5 分鐘。
3.3.3. 將溶解且含飽和CO2 之NaHCO3 溶液加入溶解之液體培養基中混合。混后溶液之pH 應為7.2-7.4，除非pH 值偏差太大，否則不需用酸堿再調整之。若為太堿，可再通入CO2 氣體調整pH。培養基以真空幫浦通過過濾膜時， pH 會升高0.1-0.2。
3.3.4. 以0.1 或0.2 mm 無菌過濾膜過濾滅菌，同時分裝至無菌容器中，標示培養基種類、日期、瓶號等，貯存于4 oC。（血清亦可加入培養基中一起過濾）
3.3.5. 配制之培養基配制須作生長試驗與污染測試。
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