羅丹明標記VEGF抗體IgG，Anti-VEGF/RBITC

Western bloting在抗體生產中的應用
     Western bloting是用來對蛋白質進行檢測的一種常用方法，通過抗原抗體的免疫反應可以定量測出抗體的相對分子量，以及抗體的相對豐度或與已知抗原的關系等等。目前它應用在多個領域,在臨床上檢測傳染病和自身免疫病、過敏癥等，在抗體生產領域它與ELISA、ICC、IHC、IFA等免疫技術相接合已成為單克隆抗體生產的主要篩選手段。
     在單抗的篩選過程中通常釆用幾中免疫技術并存的方式進行篩選，針對不同的抗體釆用不同的技術，有利于提搞抗體生產的篩選效率，下面就針對幾種常用的方法與Western blot進行比較：
方法        ELISA        WB        IHC/ICC        免疫熒光（IFA）
操作        簡單，周期短        復雜，周期長        較簡單        較簡單（要專門的熒光顯微鏡）
靈敏度        高，易產生假陽性        高，特異性高        較WB低        較ICC高
交叉        有.        有，易識別（根據抗原分子的大小）        有，難識別        有
準確度        定性        定性定分子量        定位        定位
載體        酶標板        凝膠、膜        玻片        玻片
結果        普通顯色        化學化光/普通顯色        普通顯色        熒光
在抗體檢測中Western bloting經常要注意到目標抗體與抗原（細胞/組織裂解液）的接合能力，特別是交叉現象，所以一定要設置好對照實驗。同時還有測血、測母克隆亞克隆過程中一定要注意抗體的稀釋倍數以及二抗的使用等等。
總而言之，做Wetern bloting實驗熟練撐握原理和操作是前提，關鍵是統籌整個實驗流程，合理安排，注意細節，這樣才能保證實驗的性和準確性。