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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2023-03-16 09:58:47瀏覽次數：257
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中文名稱：pTG-T載體連接試劑盒
英文名稱：pTG-T Vector Ligation Kit
產品規格：20次|60次
發貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0164745
產品介紹：
本試劑盒適用于PCR產物的克隆，可將PCR產物連接到pTG-T載體上，便于進行下一步實驗。DNA片段連接是經常出問題的步驟，為了提高連接效率，本試劑盒提供了兩種連接Buffer供不同情況選擇：10×Ligation Buffer Ⅰ適合置于16℃連接過夜，可獲得佳連接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ為快速連接Buffer，25℃連接10分鐘即可轉化，快捷方便。 英文名稱：pTG-T Vector Ligation Kit 產品規格：20次|60次 本試劑盒適用于PCR產物的克隆，可將PCR產物連接到pTG-T載體上，便于進行下一步實驗。DNA片段連接是經常出問題的步驟，為了提高連接效率，本試劑盒提供了兩種連接Buffer供不同情況選擇：10×Ligation Buffer Ⅰ適合置于16℃連接過夜，可獲得佳連接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ為快速連接Buffer，25℃連接10分鐘即可轉化，快捷方便。 pTG-T是一種高效克隆PCR產物的專用載體，它是由一種克隆載體在EcoRV酶切位點處切開，在兩側的3′端添加T而成。由于大部分耐熱聚合酶反應時都會在PCR產物的3′端添加一個A，可與pTG-T 3′端的T互補連接，因此可大大提高PCR產物的連接和克隆效率。連接使用的PCR片段3′端應帶有A末端，如果是使用pfu等高保真聚合酶擴增的不帶A末端的片段，應使用平末端連接試劑盒先加A末端后再連接。 帶有插入片段的重組子可根據α互補原理，進行藍白斑篩選，判斷載體中有無外源基因的插入（白色克隆為陽性重組克隆，藍色的為載體自連的克隆，具體篩選原理參考分子克隆等書籍）。克隆后，可使用通用引物T7、SP6進行測序。 保存條件：-20℃保存，避免反復凍融（載體和連接試劑可以適當的分裝成小份，防止反復凍融，以保證質量）。 |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
動物細胞周期G2期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
動物細胞周期M期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
通用型動物細胞周期（G1/S和G2/M期）同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
植物細胞周期G0期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
植物細胞周期G1早期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
小鼠脂聯素(ADP)elisa ，英文名： ADP ELISA Kit
小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA檢測試劑盒Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)免疫試劑盒 Human BECN1 ELISA Kit
Ratadiponectin,ADPELISAKit大鼠脂聯素(ADP)elisa規格：96T/48T
載玻片細胞TNFBETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSelisa小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa規格：96T/48T
pTG-T載體連接試劑盒直接紅素D-BIL試劑盒化學氧化法 96T 微板法
脂質過氧化物LPO含量測試盒 20T 50T 100T 比色法
脂肪組織蛋白提取試劑盒50T
脂肪組織蛋白提取試劑盒100T
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒
生物醫學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點，本公司開發了本產品。
