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上海邦景實業有限公司
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細胞分裝與凍存
2025-6-16 閱讀(2)
細胞培養的傳代及日常維持過程中，在培養器具、培養液及各種準備工作方面都需大量的耗費，而且細胞一旦離開活體開始原代培養，它的各種生物特性都將逐漸發生變化并隨著傳代次數的增加和體外環境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中，溫度達-196℃，理論上儲存時間是無限的。
細胞分裝與凍存：
1.將重懸后的細胞懸液分裝至標記好的凍存管中，每管分裝的細胞懸液體積一般為 1 - 1.5 ml。在分裝過程中，要注意避免產生氣泡，同時確保凍存管密封良好。
2.由于使用的凍存方式不同會有不同的凍存方法，請選擇合適的凍存步驟。
a. 使用傳統方法：將凍存管先放入 4℃冰箱中靜置60 分鐘，使細胞逐漸適應低溫環境。然后將凍存管轉移至 -20℃冰箱中放置2小時，接著再放入-80℃冰箱過夜。最后，將凍存管迅速轉移至液氮罐中進行長期保存。在轉移過程中，要盡量縮短凍存管在室溫及 -20℃以上環境中的停留時間，防止細胞受損。
b. 使用凍存盒：將凍存管放入4℃預冷的凍存盒（確保凍存盒已加滿或更新異丙醇）中，然后快速將凍存管轉移至-80℃冰箱過夜。最后，將凍存管迅速轉移至液氮罐中進行長期保存。在轉移過程中，要盡量縮短凍存管在室溫及 -20℃以上環境中的停留時間，防止細胞受損。
c. 使用細胞凍存液：將凍存管轉移至-80℃冰箱過夜，然后將凍存管迅速轉移至液氮罐中進行長期保存。在轉移過程中，要盡量縮短凍存管在室溫及 -20℃以上環境中的停留時間，防止細胞受損。
