怎樣選擇保護(hù)柱，但又不影響分離分析？通常，在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔，對于大部分分析工作者來說，一只1cm長的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用。但是，如果樣品非常不清潔，或工作中發(fā)現(xiàn)經(jīng)常要更換1cm的保護(hù)柱，那么就應(yīng)該選用2cm或3cm的保護(hù)柱，保護(hù)柱越長自然所裝填的色譜填料就越多，則其保護(hù)性能越好，當(dāng)然隨著保護(hù)柱長度的增加，樣品的保留時間也相應(yīng)增加，一般來說，保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析色譜柱的內(nèi)徑相同或相當(dāng)即可。 保護(hù)柱的填料裝填方式也很重要，目前有薄膜裝填法的保護(hù)柱，使用過程簡單方便，而且可以在實驗室中進(jìn)行干裝。但是，其zui大的缺點是不經(jīng)濟(jì)，特別是針對中國的具體情況，一次性使用相對費用較高。另外，薄膜裝填法的保護(hù)柱所裝填的色譜填料有限，只能提供很有限的保護(hù)作用；不過也因為所裝填的色譜填料較少，保護(hù)柱的長度也較短，所以對分析樣品的保留時間的影響也很小。 另一種保護(hù)柱結(jié)構(gòu)其實質(zhì)是縮短了色譜分析柱，設(shè)計方式上有直連式/手緊式或整體式。整體式設(shè)計是由色譜柱的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的，必須與色譜分析柱一同訂貨，可以非常方便的使用，但不能被修改。直連式結(jié)構(gòu)設(shè)計可以在任何時候由色譜工作者來安裝連接，可以與任何品牌的色譜柱連接使用，而且可以根據(jù)不同的樣品選擇合適的保護(hù)柱長度。手緊式保護(hù)柱從結(jié)構(gòu)上講是與直連式保護(hù)柱一樣，只是在連接時不用借助扳手等工具，直接用手上緊即可。另外從保護(hù)柱結(jié)構(gòu)的角度看，保護(hù)柱結(jié)構(gòu)又分為是否可以更換保護(hù)柱柱芯，現(xiàn)在大多數(shù)的保護(hù)柱均可以更換柱芯，可以降低保護(hù)柱的使用成本。 大多數(shù)人是根據(jù)色譜分析柱的填料來選擇保護(hù)柱的填料，正常情況下可以選擇與分析色譜柱一樣的色譜填料。但是，根據(jù)實際的分析工作，也可不必與分析色譜柱的填料匹配。 對于選擇保護(hù)柱的原則是：在滿足分離分析要求的前提條件下，盡可能的選擇較短的保護(hù)柱，盡可能選擇對分離樣品小一些保留性的填料。
 

　　高效液相色譜儀緩沖鹽使用不當(dāng)?shù)暮蠊?br /> 

　　在高效液相色譜儀分析過程中，緩沖液是的，因為要用它來調(diào)節(jié)流動相的pH值，緩沖鹽使用不當(dāng)，后果可是吃不了兜著走。比如說，液相色譜儀的色譜柱壓升高、柱效下降、保留時間異常等等不良影響：
 

　　1、柱壓升高；
 

　　原因：緩沖鹽使用不當(dāng)導(dǎo)致緩沖鹽析出，堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙，阻礙流動相傳質(zhì)，引起柱壓升高。
 

　　2、相同化合物的保留時間發(fā)生變化；
 

　　原因：如果沒有沖洗干凈就進(jìn)行進(jìn)樣，色譜柱內(nèi)含有的鹽會使化合物的保留時間發(fā)生變化。
 

　　3、柱效下降；
 

　　原因：
 

　　i、有些緩沖鹽會滲入到鍵合相的深處，損害硅膠基體，導(dǎo)致色譜柱鍵合相流失，柱床變松，柱效下降；
 

　　ii、凝結(jié)在鍵合相表面，使C18碳鏈難以舒展，對物質(zhì)的保留能力下降，導(dǎo)致柱效下降。因此液相色譜儀用過緩沖鹽后需要對色譜柱進(jìn)行沖洗，水中緩沖鹽濃度較大時應(yīng)特別引起注意。