細胞:HIT-T15細胞
中文名稱:倉鼠beta胰島β細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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在受精過程中, 哺乳動物卵子細胞內的鈣離子濃度呈現連續性反復升高.
有證據表明: 將受精的1-和2-細胞期的胚胎細胞核移植到未受精卵中能導致卵子產生鈣升高并使該重構胚激活.
(人 Caco-2細胞 結直腸腺癌細胞)(人 Ca Ski細胞 癌細胞)
然而, 尚不清楚胚胎細胞核這種誘導卵子內鈣升高的能力是如何獲得的, 是否處于不同發育階段的早期胚胎細胞核都具有這種能力. (人 D341 Med細胞 髓母細胞瘤細胞)(人 DMF7細胞 腎細胞)
利用細胞核移植技術, 將小鼠受精早期胚胎細胞核移植到成熟卵母細胞中, 并測定該重構胚細胞內鈣含量變化
(人 HCT-8細胞 結直腸腺癌細胞)(人 HEC-1-B細胞 子宮內膜腺癌細胞)
結果表明:受精1-和2-細胞期的細胞核具有誘導成熟卵子鈣釋放活性的功能, 而4-和8-細胞期細胞核、融合的2或3個4-細胞期的細胞核及乙醇孤雌活化的原核均不具有這種能力.
(小鼠 Hepa 1-6細胞 肝癌細胞)(人 CCC-HPF-1細胞 胚肺成纖維細胞)
結果說明:胚胎細胞核誘導卵子細胞內鈣升高的能力是受精過程中產生的, 是受精胚特_有的, 它存在于早期受精胚的特殊發育階段. 這暗示早期受精胚這一特_有的能力對胚胎的正常發育具有重要意義.