細胞:SK-MEL-28細胞
中文名稱:人黑色素瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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神經干細胞的應用:
神經干細胞在神經發(fā)育和修復受損神經組織中發(fā)揮重要作用。神經干細胞移植是修復和代替受損腦組織的有效方法 ,能重建部分環(huán)路和功能。(3T3-L1成纖維細胞 種屬:小鼠)
此外神經干細胞可作為基因載體 ,用于顱內腫瘤和其它神經疾病的基因治療 ,利用神經干細胞作為基因治療載體 ,彌補了病毒載體的一些不足。(BeWo胎盤絨膜癌細胞 種屬:人)
科研人員將神經干細胞移植到帕金森病模型的鼠腦 ,神經干細胞在其腦組織中遷移并修復損毀的腦組織 ,且震顫癥狀明顯減輕 ,可能是神經干細胞分化成為多巴胺能神經元起到治療作用。
多發(fā)性硬化是發(fā)病率較高的神經系統(tǒng)疾病 ,在其嚙齒類動物模型中發(fā)現產生髓鞘的少突膠質細胞被破壞或失去功能 ,將神經干細胞直接移植到鼠腦中 ,移植的細胞在腦中發(fā)生了大范圍的遷移 ,在分化成的少突膠質細胞中 ,約40 %的細胞形成了髓鞘 ,其特性非常接近正常狀態(tài) ,一些接受移植的動物其典型的癥狀也得到了明顯的改善。(HCT 116結直腸腺癌細胞 種屬:人 )
腦膠質瘤是醫(yī)學治療的難點之一 ,手術切除腫瘤困難 ,且容易復發(fā) ,放療和化療對腫瘤有一定的作用。由于神經干細胞具有遷移的功能 ,利用這種特性可以向腦部釋放藥物。(HK-2曲小管上皮細胞 種屬:人)
對鼠神經干細胞進行轉基因處理 ,使之分泌IL-4,這種物質能夠激活免疫系統(tǒng) ,對腫瘤細胞發(fā)生抗瘤攻擊 ,患有腦膠質瘤的實驗鼠接受這種細胞注射之后,壽命比未治療的實驗鼠大大延長 ,核磁共振成像表明 ,實驗鼠腦部的大塊腫瘤有縮小的跡象 ,有趣的是 ,既使注射的神經干細胞不分泌IL-4,實驗鼠的壽命也會延長。
這是由于神經干細胞還能分泌一種能夠減緩腫瘤細胞分裂的未知物質的緣故。(COS-1腎細胞 種屬:猴)
神經干細胞對于判斷藥效及藥物毒性等也有一定實用價值,如可以利用神經干細胞培養(yǎng)技術觀察某些天然化合物和合成化合物的神經活性 ,為發(fā)展小分子治療藥物提供理論基礎。