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厭氧設備在進入正常運行之前也應進行污泥的培養和馴化。厭氧處理工藝的缺點之一是微生物增殖緩慢，設備啟動時間長，若能取得大量的厭氧活性污泥就可縮短投產期。厭氧活性污泥可以取自正在工作的厭氧處理構筑物、江河湖泊沼澤底、下水道及污水集積腐臭處等厭氧環境中的污泥，選擇同類物料厭氧消化污泥。如果采用一般的未經消化的有機污泥自行培養，所需時間更長。一般來說，接種污泥量為反應器有效容積的10%-90%，依消化污泥的來源方便情況酌定，原則上接種量比例增大，啟動時間縮短。其次是接種污泥中所含微生物種類的比例也應協調，特別要求含豐富的產甲烷細菌，因為它繁殖的世代時間較長。
在啟動過程中，控制升溫速度為1.C/h，達到要求溫度即保持恒溫。注意保持PH值在6.8-7.8之間。此外，有機負荷常常成為影響啟動成功的關鍵性因素。啟動的初始有機負荷因工藝類型、廢水性質、溫度等的工藝條件以及接種污泥的性質而異。常取較低的初始負荷，繼而通過逐步增加負荷而完成啟動。有的工藝對負荷的要求格外嚴格，例如厭氧污泥床反應器啟動時，初始負荷僅為0.1kgCOD/（kgMLSS.d）-0.2kgCOD/(kgMLSS.d）（相應的容積負荷則依污泥的濃度而異），至可降解的COD去除率達到80%，或者反應器出水中揮發性有機酸的濃度已較低（低于1000mg/L）的時候，再以每一步按原負荷的50%遞增幅度增加負荷。如果出水中揮發性有機酸濃度較高，則不宜再提高負荷，甚至應酌情降低。其他厭氧消化器對初始負荷以及隨后負荷遞增過程的要求，不如厭氧污泥床反應器嚴格，故啟動所需的時間往往較短。此外，當廢水的緩沖性能較佳時，可在較高的負荷下完成啟動，如1.2kgCOD/（kgMLSS.d）-1.5kgCOD/(kgMLSS.d），這種啟動方式時間較短。但對含碳水化合物較多、缺乏緩沖性物質的料液，需添加一些緩沖物質才能高負荷啟動，否則，易使系統酸敗，啟動難以成功。
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