大鼠elisa檢測試劑盒結合物的制備

大鼠elisa檢測試劑盒酶標記抗體的制備方法主要有兩種，即戊二醛交聯法和過碘酸鹽氧化法。 （1）戊二醛交聯法：戊二醛是一種雙功能團試劑，它可以使酶與蛋白質的氨基通過它而聯結。堿性磷酸一般用此法進行標記。交聯方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應后即得酶標記抗體。      
ELISA中常用的酶一般都用此法交聯。它有操作簡便、有效（結合率達60%-70%）和重復性好等優點。缺點是交聯反應是隨機的，酶與抗體交聯時分子間的比例不嚴格，結合物的大小也不均一，酶與酶，抗體與抗體之間也有可能交聯，影響效果。在兩步法中，先將酶與戊二醛作用，透析除去多余的戊二醛后，再與抗體作用而形成酶標抗體。也可先將抗體與戊二醛作用，再與酶聯結。兩步法的產物中絕大部分的酶與蛋白質是以1:1的比例結合的，較一步法的酶結合物更有助于本底的改善以提高敏感度，但其偶聯的有效率較一步法低。
（2）過碘酸鹽氧化法：本法只適用于含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的標記常用此法。反應時，過碘酸鈉將HRP分子表面的多糖氧化為醛基很活潑，可與蛋白質上的氨基形成Schiff氏堿而結合。酶標記物按克分子比例聯結，其比例為：酶/抗體=1-2/1。此法簡便有效，一般認為是HRPzui可取的標記方法，但也有人認為所有試劑較為強烈，各批實驗結果不易重演。    
按以上方法制備的酶結合物一般都混有未結合物的酶和抗體。理論上，結合物中混有的游離酶一般不影響大鼠elisa檢測試劑盒中zui后的酶活性測定，因經過*洗滌，游離酶可被除去，并不影響zui終的顯色。但游離的抗體則不同，它會與酶標抗體競爭相應的固相抗原，從而減少了結合到固相上的酶標抗體的量。因此制備的酶結合物應予純化，去除游離的酶和抗體后用于檢測，效果更好。純化的方法很多，分離大分子化合物的方法均可應用。硫酸銨鹽析法zui為簡便，但效果并不理想，因為此法只能去除留在上清中的游離酶，但相當數量的游離抗體仍與酶結合物一起沉淀而不能分開。用離子交換層析或分子篩分離更為可取，液相層析法可將制備的結合物清晰地分成三個部分：游離酶、游離抗體和純結合物而取得分離效果，但費用較貴。
300mg    3458-28-4     甘露糖標準品    Mannose
300mg    73816-42-9     磺基水楊酸氯甲烯*標準品    Meclocycline Sulfosalicylate 
300mg    119478-56-7     *標準品    Meropenem 
300mg    110-42-9     癸酸甲酯標準品    Methyl Caprate 
300mg    106-70-7     己酸甲酯標準品    Methyl Caproate 
300mg    111-11-5     辛酸甲酯標準品    Methyl Caprylate 
300mg    124-10-7     肉豆蔻酸甲酯標準品    Methyl Myristate 
300mg    112-39-0     棕櫚酸甲酯標準品    Methyl Palmitate 
300mg    1120-25-8     棕櫚油酸甲酯標準品    Methyl Palmitoleate
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