免疫組織化學方法的原理

時間：2015/8/21閱讀：215

免疫組織化學（immunohistochemistry）又稱免疫細胞化學（immunocytochemistry），是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項技術。

1.基本原理

抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性，免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的，因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來，以其達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性，定位或定量的研究。

2.幾種常用的免疫組織化學方法的原理

免疫熒光細胞化學技術

將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量.

免疫酶細胞化學

是目前免疫組織化學研究中zui常用的技術．基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞或組織內的相應抗原進行定位或定性研究．

免疫膠體金技術

就是用膠體金標記一抗，二抗或其他的能特異性的結合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白）等作為探針，對組織或細胞內的抗原進行定性，定位或定量研究．由于膠體金的電子密度高，多用于免疫電鏡的單標記或多標記的定位研究．

免疫組織化學的全過程包括：①抗原的提取與純化；③免疫動物或細胞融合，制備特異性抗體以及抗體的純化；③將顯色劑與抗體結合形成標記抗體；④標本的制備；③免疫細胞化學反應以及呈色反應；⑧觀察結果。

免疫組織化學方法的原理

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