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        非特異性染色的原因

        時間:2015/8/12閱讀:239
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        一、非特異性染色的識別

        常出現在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處,壞死組織及固定不良的組織中心處。表現為彌漫性,均勻性的背景染色。也可以是隨機分布的陽性反應產物點、團或塊狀。抗體

        二、非特異性染色的原因

        1. Ig與Fc受體結合

        多見于冰凍切片(特別是淋巴造血組織,淋巴細胞,單核細胞,組織細胞表面多),主要是和二抗反應,因為一抗一般稀釋度均較大,因此Fc受體的干擾基本不存在。由于福爾馬林固定破壞了大部分的Fc受體,所以石蠟切片不多見。

        避免方法:

        (1)用以二抗相同種族的正常血清封閉切片;

        (2)用不含Fc段的抗體,但價格貴。(V區,C1區不含Fc段,用Pepsin消化)

        2. 靜電吸附

        抗體是一種帶負電荷的球蛋白,容易和帶正電荷的組織相結合,如膠原纖維。

        避免方法:

        (1)盡量稀釋一抗;

        (2)降低抗體的電荷,如用2.5%NaCl,0.05mTBS代替PBS;

        (3)用去垢劑如triton-100,Tween-20等處理切片。

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