熒光物質(zhì)的強(qiáng)度與穩(wěn)定性特性

    熒光強(qiáng)度：熒光強(qiáng)度(fluorescence intensity)是指熒光色素發(fā)射熒光的光量子數(shù)，決定熒光色素檢測的靈敏度。在一定范圍內(nèi)，激發(fā)光越強(qiáng)．熒光也越強(qiáng)，即熒光強(qiáng)度等于吸收光強(qiáng)度乘以熒光效率。所以，選用適當(dāng)強(qiáng)度的光源作為激發(fā)光源和選用適合于被檢熒光物質(zhì)選擇性吸收的光譜濾片作為激發(fā)濾片，是提高熒光強(qiáng)度的根本方法。ELISA試劑盒
 
    熒光物質(zhì)的吸收光譜和發(fā)射光譜：每種熒光物質(zhì)的吸收光不僅有一定波長。而且在各波長上的吸收量也不同，從而構(gòu)成特殊的吸收光譜曲線；發(fā)射熒光的情況也是如此。因此，熒光物質(zhì)在一定條件下有一定的吸收光譜(激發(fā)光譜)和發(fā)射光譜(熒光光譜)，如吖啶橙的吸收光譜(zui大吸收波長)是455nm，其發(fā)射波長光譜為450～700nm。因此，吖啶橙與不同細(xì)胞成分結(jié)合后。可產(chǎn)生橙、黃、紅、綠等熒光。了解各種熒光染料的吸收光譜和發(fā)射光譜，有利于在觀察被檢標(biāo)本時(shí)，有效地選擇適當(dāng)?shù)臑V片，獲得的熒光效果。ELISA試劑盒
 
    熒光穩(wěn)定性：提高激發(fā)光強(qiáng)度固然可以提高熒光強(qiáng)度，但激發(fā)光強(qiáng)度不可能無限提高。因?yàn)榧ぐl(fā)光強(qiáng)度超過一定限度時(shí)光吸收趨于飽和，而且不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子，這種現(xiàn)象稱光漂白。對(duì)于熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡而言，如光源長時(shí)間照射樣品。可導(dǎo)致光漂白現(xiàn)象，嚴(yán)重影響檢測。解決光漂白問題zui直接的方法：一是降低光照強(qiáng)度，二是使用抗淬滅劑(anti-fade reagent)。ELISA試劑盒