ELISA試劑盒試驗的標準曲線和測定的重復性差的原因

在ELISA試劑盒實驗中，有很多新手在檢測時候遇到試驗的標準曲線和測定的重復性差，這是什么原因造成的？上海通蔚生物就以上問題作出具體解答，歡迎參考學習。
 

在ELISA試劑盒實驗中常見原因如下：
a)可能原因：加樣本及試劑量不準；孔間不一致；
解決方法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊密。
重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近；
重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；樣品稀釋前應充分混勻。
b)可能原因：加樣過快，孔間發生污染；
解決方法：重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；加樣不要過快。         
c)可能原因：加錯樣本；
解決方法：檢查記錄和試劑，是否加錯樣本。
d)可能原因：加樣本及試劑時，加在孔壁上部非包被區；
解決方法：加樣槍頭不要貼壁。
e)可能原因：不同批號試劑盒中組分混用；
解決方法：不同批號試劑盒中組分不可混用。
f)可能原因：溫育時間、洗板、顯色時間不一致；
解決方法：檢查時間是否一致。
g)可能原因：孔內污染雜物；
解決方法：離心樣品，排除雜物。
h)可能原因：試劑/樣品沒有混勻；
解決方法：充分混勻樣品和試劑。
i)可能原因：血清標本未*凝固即加入，反應孔內出現纖維蛋白凝固或殘留血    
細胞，易出現假陽性反應等。
解決方法：待血清標本*凝固后做試驗。
 

在ELISA試劑盒實驗室，對試劑準備一般不太注意，通常的做法是，在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題，其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現假陰性。上海通蔚生物代理的ELISA試劑盒預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿、組織勻漿或其它相關生物液體中目標蛋白含量。