通蔚生物帶您了解細胞換液的方式有哪些

細胞換液是指去除舊的培養基，換成新的培養基以繼續提供細胞充足的營養支持。當舊培養基 ph 值改變（含酚紅的培養基通常是變酸發黃）時，需要及時進行換液。在培養細胞的過程中，換液是一項非常常規操作，它主要是為了清除細胞在生長過程中產生的各種代謝廢物，補充新鮮的培養基，促進細胞生長。細胞換液主要有全換液和半換液兩種方式，那么，不同方式的換液方法如何更換細胞培養瓶內的溶液呢？

換液前工作準備

環境準備：相對密封、防塵、防菌的無菌室

操作者準備：雙手清潔呈可操作狀態

物品準備：超凈工作臺、CO2培養箱、裝有75%醫用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養基、巴氏吸管、移液器、廢液缸。

工作準備：預熱培養基，酒精棉擦拭培養基瓶外表面后移入生物安全柜/超凈工作臺。

細胞培養箱中取出的細胞，酒精棉擦拭培養瓶/皿外表面，移入生物安全柜/超凈工作臺。可以稍等待，待生物安全柜中的循環風將試劑瓶和培養瓶的外表面吹拂幾分鐘后，擰開培養基瓶蓋虛掩，擰開培養瓶瓶蓋虛掩，培養皿蓋不用擰。

第一種方式：細胞全換液

如果是貼壁細胞，可以用全量換液法，直接吸去全部舊培養基，補充足量新鮮培養基。

細胞全換液具體步驟

1.將器材放入超凈臺，打開紫外照射滅菌，若是培養的細胞對溫度比較敏感，可以將含血清的培養基瓶放入37℃的水浴箱使得培養基溫度在37℃，再轉移到超凈臺紫外滅菌。另外，細胞培養間也需要紫外照射半小時左右。

2.從培養箱取出細胞培養瓶，用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒，轉移到超凈臺，打開蓋子，輕輕吸出舊的培養液，可用移液器加入新鮮含血清培養基，注意一定不要從細胞貼壁面加入培養基，應從側壁加，動作輕柔，以免沖落細胞。

3.加好培養基后，蓋上蓋子，在瓶子上做標記，注明換液時間，細胞種類，操作人員等信息。

4.放入培養箱之前應再次用酒精噴一噴瓶子表面，然后應記得整理操作臺，用酒精擦拭超凈臺臺面，清理廢液和垃圾。

第二種方式：細胞半換液

“細胞半換液"又稱“細胞半量換液"，即棄掉一半舊的培養基，再加一半新的進去。選它的原因其實與前面不加PBS的理由有點相近。

半換液原因

1.給細胞提供適應的緩沖環境；

2.細胞生長過程中可能會分泌某些生長因子，促進生長；

3.節省材料

4.方便操作：比如96孔板，換液很麻煩。所以常采用排槍進行半換液；

5.對于懸浮細胞的培養，有時也會選用半換液減低細胞密度；

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