通蔚生物為您談談ELISA試劑盒在運用過程中有哪些

ELISA試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標液1PPM，就是1毫克/升，而作出標準數據為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%，這個與真實成分有密切的關系，說明方法的準確度。

比如水中總無機氯含量測定，樣品水中含有無機氯20mg/L，取100mL被測水樣品，加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品，測定時忽略體積變化，如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L，則認為回收率為99%。

下面談談ELISA試劑盒的運用過程：

1.ELISA試劑盒用于檢測的樣品應保持新鮮.

2.用戶在初度運用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底.

3.每次試驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4.丈量時先用此孔調OD值至零.

4.要確保微量加樣器的確性,能夠運用蒸餾水和電子天平進行確定（因為蒸餾水不含雜質,溫度環境為20%左右時,lmL的水能夠看作是lg 200 L的水能夠看作是0.2g）每一把微量加樣器都應該將其zui高量程和zui低量程進行確定.

5.因為底物顯色劑對光及其靈敏,因此要避光保存.

6.手藝洗板時每次參加洗滌液后.應靜置15～30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染.甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干.

7.檢測吸光度前應將酶標儀翻開,將其預熱30min以上.

8.底物為TMB,防止與皮膚相觸摸.終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應盡量防止觸摸皮膚.

9.孵育的時間應該嚴格依照試劑盒說明書上的時間為準.

10.對樣本的結果有疑問時需要運用其他檢測方法進行驗證.

11.沒有去離子水或雙蒸水時,能夠運用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿運用自來水.

12.在運用微量加樣器時,汲取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使汲取標準品溶液.

13.汲取液體時速度不易太快,以免發生氣泡,汲取的量不夠準確.

14.將液體加到酶標孔中時,防止槍頭和孔內液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孑L壁觸摸,液滴會自然流下去.吸入液體時的方法是吸兩檔打一檔,防止因為槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差.

15.汲取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差.

16.試驗前30min將試劑盒中的一切試劑從冰箱取出,使試劑盒中的一切試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只需取出所需量.

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