有關試劑盒標準曲線做不好有哪些原因原因

試劑盒被廣泛應用于各種抗原和抗體測定，但測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果，引起測定錯誤結果的原因主要有：

（1）試劑盒因素

（2）標本因素

（3）操作因素

試劑盒需要注意的事項是：

1. 在做完整的實驗過儀器之前，儀器預熱半小時，這個計算好時間，也可以直接將儀器一直開著，直到整個實驗結束。

2. 在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部，一般槍頭都懸空，可以將槍頭靠在孔邊緣，

3. 但槍頭尖懸空，如果槍頭上殘留液體看整體多少量，不要吹打下去，特別忌諱在版孔內壁流向版孔，整個加液過程不要產生氣泡（洗滌液除外）。

試劑盒標準曲線做不好的原因分析：

A、剛加完顯色劑時梯度明顯，顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。

B、酶濃度太高，導致zui后顯色結果都是高的。

C、包被：酶標系統不匹配或者酶標的非特異反應太強，或者酶標儀讀數范圍不夠。

D、樣本中有能夠催化底物的物質，沒洗下來。

建議：包被、酶標重新做梯度，先用較低的濃度把梯度摸索好，然后再優化靈敏度，zui后調出所需的靈敏度、線性范圍。

建議：有條件的話，可以把酶免的蛋白系統移植到板式化學發光上，加完底物三分鐘讀數。

建議：蛋白系統靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了。

建議：酶是自己標的這種情況的，HRP比例不要太高。

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