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        所在地區:上海上海市

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        大鼠(Rat)骨鈣素BGP

        閱讀:502發布時間:2010-03-30

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          上海酶聯生物研究所

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        一、試 劑 組 成

        精密度微孔板96

        Microtitration Strips

        1

        28℃干燥保存

        酶標偶合液

        Conjugate   

        1 12.0毫升

        28℃冷藏保存

        標準品

        Standard

        5瓶 各1.0毫升

        28℃冷藏保存

        呈色劑A

        Substrate A

        1 6.0毫升

        28℃避光冷藏保存

        呈色劑B

        Substrate B

        1 6.0毫升

        28℃避光冷藏保存

        終止液

        Stopping Solution

        1 6.0毫升

        室溫保存

        20倍濃縮洗滌液

        Rinsing Buffer x 20

        1 60.0毫升

        28℃冷藏保存

        5倍濃縮樣品稀釋液

        Diluent x 5

        1 15.0ml

        28℃冷藏保存

        英文說明書,中文說明書

         

        各一份

        室溫保存

         

        二、注意事項

        1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。

        2.  使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,

        3.  濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。

        4.  濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘

        5.  24小時內進行實驗,標本可存放于28℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。

        6.  在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。

        7.  加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。

        8.  試劑盒保存于28℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。

         

        三、實驗前準備

        1使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。

        2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫用蒸餾水等

        3濃縮洗液與醫用蒸餾水119倍稀釋后成為應用洗滌液

        4濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水14倍稀釋成應用樣品稀釋液

        5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

         

        四、操 作 步 驟

        1.取出酶標板,設空白孔,依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫用蒸餾水替代

        2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

        3、將酶標板置于37溫育30分鐘;

        4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;

        5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

        6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

        7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

        8、將96孔板置于37溫育30分鐘。

        9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。

        10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

        11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

        12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。A液、B液采用不同的吸頭加樣)

        13、將酶標板置于37避光溫育反應15分鐘。

        14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻

        15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內進行測定。

        16、根據制備的標準曲線,計算樣本含量

         

        五、結 果 判 斷

        1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;

        2、檢測值范圍:0160ng/ml

        3、敏感度:1.0 ng/ml

         

         


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