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        上海酶聯(lián)生物研究所


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        經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

        商鋪產(chǎn)品:4010條

        所在地區(qū):上海上海市

        聯(lián)系人:采購(gòu)部 (經(jīng)理)

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        48T人卵清蛋白特異性IgEELISA檢測(cè)試劑盒的試驗(yàn)注意事項(xiàng)

        閱讀:358發(fā)布時(shí)間:2012-10-18

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        上海工碩生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬ELISA試劑盒,金標(biāo)試劑盒,細(xì)胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測(cè)試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。

        人卵清蛋白特異性IgEELISA檢測(cè)試劑盒

        試驗(yàn)原理:
            OVA-IgE試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知OVA-IgE濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將OVA-IgE和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中OVA-IgE的濃度呈比例關(guān)系。

        自備材料
        蒸餾水。
        加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
        振蕩器及磁力攪拌器等。

        安全性
        避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
        實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

        人卵清蛋白特異性IgEELISA檢測(cè)試劑盒

        操作注意事項(xiàng)
        試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
        實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
        不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
        底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
        按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

        人卵清蛋白特異性IgEELISA檢測(cè)試劑盒

        樣品收集、處理及保存方法
        血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
        保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        人卵清蛋白特異性IgEELISA檢測(cè)試劑盒

        操作步驟
        使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
        根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
        加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
        甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
        在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

        局限
        6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。

        人卵清蛋白特異性IgEELISA檢測(cè)試劑盒

        試劑盒性能
        1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
        2. 特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
        3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

        結(jié) 果 判 斷 與 分 析
        1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
        2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的OVA-IgE標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的OVA-IgE含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
        3、檢測(cè)值范圍:0-8.0IU/L
        4、敏感度: 0.01 IU/LRabbit anti-chicken IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗雞IgM(10nm/15nm) 2ml
        HSP-70 (Heat shock protein-70) 熱休克蛋白-70抗體 0.1ml
        HSP-70 (Heat shock protein-70) 熱休克蛋白-70抗體 0.2ml
        HSP75/TRAP-1(Heat Shock Protein 75) 熱休克蛋白-75抗體 0.2ml
        HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 熱休克蛋白90α抗體 0.1ml
        HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 熱休克蛋白90α抗體 0.2ml
        HSP-90β (heat sock protein-90β) 熱休克蛋白-90β 抗體 0.1ml
        Rabbit anti-dog IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗狗IgG (10nm/15nm) 2ml
        HSP-90β (heat sock protein-90β) 熱休克蛋白-90β 抗體 0.2ml
        HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗體 0.1ml
        HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗體 0.2ml
         

        若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請(qǐng)聯(lián)系人:王   021-57688126


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