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細胞: 腫瘤細胞正常細胞原代細胞

培養(yǎng)基: 微生物檢驗系列其它生化鑒定管其它細菌檢測培養(yǎng)基抗生素檢驗、藥敏試驗用培養(yǎng)基淋病奈瑟菌分枝桿菌結核桿菌炭疽桿菌鼠疫桿菌彎曲桿菌（包括空腸彎曲桿菌）梭狀芽胞桿菌疫苗培養(yǎng)基

生化試劑: 其它生化試劑碳水化合物類色素類其它試劑類培養(yǎng)基類酶類抗生素類緩沖劑類分離材料及耗材類4 蛋白質類表面活性劑類氨基酸類

酶聯(lián)免疫elisa試劑盒: 酶抗體ELSA試劑盒小鼠酶聯(lián)免疫elisa試劑盒豬酶聯(lián)免疫elisa試劑盒

NF-KB檢測試劑盒

原代細胞: 原代組織提取物原代細胞提取物原代細胞培養(yǎng) 新鮮原代細胞

PCR試劑盒: 進口PCR試劑盒

RNA/DNA提取: 蛋白質研究產(chǎn)品探針標記及檢測產(chǎn)品核酸電泳及回收

血清: 雞血清

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質粒

細胞系: 其它類細胞系豬細胞系猴細胞系大鼠細胞系倉鼠細胞系小鼠細胞系人細胞系

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TSZ Elisa試劑盒在細胞免疫熒光中的應用

時間：2017-7-19閱讀：832

I、TSZ Elisa試劑盒步驟：

一、固定：

PBS 5min×3次振蕩洗滌制作好的細胞爬片。

固定液覆蓋細胞，RT 靜置5min。

PBS 5min×3次振蕩洗滌。

二、通透化：

通透液覆蓋細胞，RT 靜置30min。

PBS 5min×3次振蕩洗滌。

三、封閉：

封閉液覆蓋標本表面37℃孵育h。

四、一抗孵育：

一抗以合適濃度稀釋PBS，覆蓋標本表面。

4℃孵育過夜，第二天37℃復溫h。

PBS 5min×3次振蕩洗滌。

五、TSZ Elisa試劑盒二抗孵育：

fitC標記二抗以合適濃度稀釋于PBS，覆蓋標本表面。

37℃避光孵育<60min。

PBS 5min×3次避光振蕩洗滌。

六、染核：

新鮮稀釋Hoechst覆蓋細胞表面，RT避光靜置<0min。

PBS 5min×3次避光振蕩洗滌。

七、封片：

在干凈的載玻片上滴一滴封片劑，將爬片的細胞面扣在封片劑上。

八、鏡檢，4℃避光保存。

II、注：

、細胞密度要合適，狀態(tài)較好。

2、從孵育二抗開始要避光(關閉室內日光燈即可)。

3、完成后及時鏡檢，照相;分別用不同波長激發(fā)熒光，在Photoshop軟件下合成一張圖。

III、試劑配制：

、固定液：4%多聚甲醛/PBS：

4g多聚甲醛，50～80mlPBS，加熱至60℃，持續(xù)攪拌至*溶解，(通常需滴加少許n NaOH才能使溶液清亮)，定容00ml，RT保存。

2、通透液：0.5 %(v/v)TritonX-00/PBS

3、封閉液：正常山羊血清稀釋于PBS;或商品化封閉液成品。

4、Hoechst：Hoechst33258即可。

5、TSZ Elisa試劑盒封片劑：50%(v/v)甘油/PBS。

TSZ Elisa試劑盒在細胞免疫熒光中的應用

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