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        中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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        細(xì)胞
        培養(yǎng)基
        生化試劑
        酶聯(lián)免疫elisa試劑盒
        NF-KB檢測(cè)試劑盒
        原代細(xì)胞
        PCR試劑盒
        RNA/DNA提取
        血清
        ATCC細(xì)胞
        質(zhì)粒
        細(xì)胞系

        豚鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒操作步驟

        時(shí)間:2020/4/9閱讀:842
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        豚鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。往預(yù)先包被豚鼠α干擾素(IFN-α)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豚鼠α干擾素(IFN-α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
         操作步驟
        .從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
        2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
        3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
        4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體00μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
        5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
        6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育5min。
        7.每孔加入終止液50μL,5min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
         

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