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        中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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        質(zhì)粒
        細(xì)胞系

        人波形蛋白(VIM)elisa試劑盒洗滌方法

        時(shí)間:2022/9/1閱讀:575
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        人波形蛋白(VIM)elisa試劑盒洗滌方法:

        1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

        2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

        實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。

        1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

        2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

        3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

        干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

        5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

        6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。

        7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

        8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。

        9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

        CD8a分子(CD8a)重組蛋白

        Clock同源物(CLOCK)重組蛋白

        CUB帶狀瘡疹透明區(qū)樣域蛋白1(CUZD1)重組蛋白

        C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)重組蛋白

        C-型凝集素域家族2成員C(CLEC2C)重組蛋白

        Dermokine蛋白(DMKN)重組蛋白

        Dickkopf相關(guān)蛋白2(DKK2)重組蛋白

        Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)重組蛋白

        EGF樣域蛋白6(EGFL6)重組蛋白

        EGF樣域蛋白7(EGFL7)重組蛋白

        Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白

        FK506結(jié)合蛋白樣蛋白(FKBPL)重組蛋白

        GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)重組蛋白

        GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)重組蛋白

        G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員A(GPRC5A)重組蛋白

        IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲa(FcγR3A)重組蛋白

        IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲb(FcγR3B)重組蛋白

        Juxtanodin蛋白(JN)重組蛋白

        Kruppel樣因子4(KLF4)重組蛋白

        Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白


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