基因工程抗體及其功能試劑

80年代后人們開始使用基因工程技術制備抗體，并進而將抗體分子片斷與其它蛋白（或另一種抗體分子）融合得到多功能試劑，到目前為止，基因工程抗體在免疫測定上的應用尚處于一個初級階段。且主要是將抗體與其它蛋白以融合蛋白形式表達而得到多功能試劑，如澳大利亞學者應用基因工程技術制備了抗人紅細胞抗體與HIV-1gpN41的融合蛋白。這種重組蛋白，即基因工程雙功能試劑，在此基礎上，建立了快速，靈敏和特異的自身紅細胞凝集試驗（AGEN）.
3.1  HIV-Elisa抗原/抗體試劑
1998年,美國首先研制第四代試劑,對檢測HIV的同時檢測P24（核心）抗原,故稱HIV抗原/抗體試劑,國內已有引進.
抗原組成:gp160gp36gp170和單克隆抗p24抗體包被.
3.1.2 P24抗原測定
采用夾心法Elisa,即將將純化的已知抗體包被，當加入帶測血清后，若血清中含有P24與包被抗體形成抗原抗體復合物，再加入酶（HRP）標記HIV抗體。在抗原上又結合了酶標記的抗體，加底物 顯色后在酶標儀上讀結果。
近來為提高檢測血清中P24抗原的敏感性，將血清中免疫復合物（ICD）解離后再進行測定。發展了（ICD） P24抗原測定技術。
3.1.3抗HIV-Elisa試劑
目前對HIV的檢測原料有了較大改進，主要如下：
（1）可用于檢測血清或血漿中HIV IgM亞特異性抗體和檢測HIV-1、2和多種亞型。
（2）標記的抗原：
  a.含HIV-1B亞型gp41和P24的HIV-1重組融合蛋白。
  b.可特異性檢測血清或血漿中HIV M群的抗體，絕大多數HIV-1.0群和HIV-2群的抗體。
  c.gp36免疫調控區的HIV-2多肽可測定特異性的HIV-2抗體。
  d.gp41的倆段HIV 1.0群多肽，可測特異性HIV 1.0 群的抗體 和HIV 1M群的抗體。
從以上抗原設計保證HIV的來自不同亞型/或區域的抗原亞型抗體的檢測。減少了變異株的漏檢。
HIV-1.0.2對759份各類臨床樣品包括401份HIV-1感染不同階段病人樣品，204分HIV-2感染不同階段病人樣品，和154份與HIV無關的其他疾病患者的樣品的檢測結果。
特異性：99.93%     靈敏度：100%
對歐洲血液中心的8842份常規鮮血者樣品用HIV-1.0.2進行評價篩選，并經確認實驗獲得的結果。
3.1.4      HIV 確認試劑—免疫印記（WB或RIBA）試劑
判斷標準
我國 HIV 抗體陽性：至少二條膜帶（即gp160/gp120）或至少一條膜帶和p24（核心）帶同時出現
美國  HIV-1陽性（任何兩個中有二條帶（P24  gp41   gp120/gp160）, HIV-2無陽性
WHO : HIV -1 陽性（不管有無核心帶或酶帶，    但有兩條膜帶）
              HIV-2陽性（不管有無核心帶或酶帶，單有兩條膜帶即為陽性）