營養缺陷型的鑒定方法

(1)營養缺陷型菌株的鑒定 營養缺陷型的鑒定方法通常有以下兩種：一個培養皿上加一種營養物質，測定許多缺陷型菌株對該種生長因子的缺陷情況；在同一培養皿上測定一種缺陷型菌株對許多生長因子的需求情況，稱生長譜測定。ELISA試劑盒營養缺陷型菌株的鑒定步驟包括測定缺陷型菌株所需生長因子類別；測定缺陷型菌株在該大類中具體需要哪種生長因子；進一步用單一生長因子進行復證試驗。

①缺陷型類別的測定通常以下列物質代表氨基酸、維生素、核酸堿基：氨基酸混合物、酪素水解物或蛋白胨代表氨基酸組；酵母浸出液，其中氨基酸、維生素、嘌呤、嘧啶都有；維生素混合物，代表維生素組；核酸堿基混合物或用酵母核酸(用o．1％堿水解液)，代表嘌呤、嘧啶類。

    將待測微生物的菌懸液加到MM中制成平板，凝固后分別用圓濾紙片沾上以上四類物質，覆于平板標定的位置上，培養后觀察濾紙片周圍生長情況。根據出現混濁的生長圈可以初步確定缺陷型所需生長因子屬于哪一大類。ELISA試劑盒

②缺陷型所需生長因子的測定通常采用分組測定法。即將21種氨基酸組合6組，每6種氨基酸歸一組；或將15種維生素組臺5組，每5種維生素歸一組。將營養缺陷型菌株和基本培養基混合制成平板，把5組或6組生長因子直接點到同一平板上，或用濾紙片沾取覆于平板上。培養后觀察生長圈，確定該營養缺陷型菌株缺陷的生長因子。

    上述方法是測定少數幾個營養缺陷型菌株時常用的方法。如要測定幾十個或上百個營養塊陷型菌株時，可用在一個平皿中加一種或一組生長因子的方法。該法只能鑒別單缺菌株。如要鑒別雙缺或多缺菌株，可以采用在每一培養肛中都缺一種生長因子的方法。ELISA試劑盒