大鼠第八因子相關(guān)抗原（FⅧAg）ELISA試劑盒操作步驟

大鼠第八因子相關(guān)抗原（FⅧAg）ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

麥芽浸膏湯

麥芽汁培養(yǎng)基

麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基

1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基

酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)

沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基

沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基

沙氏液體培養(yǎng)基

沙氏瓊脂培養(yǎng)基

霉菌液體培養(yǎng)基

馬鈴薯瓊脂

馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基(真菌營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基)

改良馬丁培養(yǎng)基 (真菌培養(yǎng)基)

高鹽察氏培養(yǎng)基

察氏培養(yǎng)基

玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基

孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅瓊脂)

Terrific Broth

去氧膽酸鹽瓊脂

頭孢磺啶(MUGal肉湯凍干配套試劑)

MFC培養(yǎng)基

MUG營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

EC-MUG培養(yǎng)基

4-甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養(yǎng)基