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        技術文章

        液相色譜儀測定蘋果中的酚類物質

        閱讀:1368發布時間:2017-6-21

        在蘋果汁加工過程中,酚類物質與果汁中的蛋白質結合,形成大分子的聚合物,從而使蘋果汁產生沉淀,影響蘋果汁的產品質量。酚類物質是果實在生長代謝中的次生產物,它對植物的生長發育和調 節、基因的誘導表達、信號轉導、紫外輻射的吸收、果蔬產品的褐變、生物固氮有一定的影響。

        實驗利用液相色譜分析酚類物質,采用反相C18柱,具有快速、操作簡單、分離效果好和同時能將不同酚類物質分開等優點。

         

        儀器設備

        LC-600B梯度液相色譜分析儀

         

        LC-600B智能全控液相色譜系統由2臺P600B高壓恒流泵、1臺UV600B紫外檢測器與1臺SCL600B系統控制器直接構成梯度分析系統。*采用柱塞浮動式安裝方式,增強儀器性能的穩定性和使用的持久性。可廣泛應用于研究開發、醫藥檢驗、食品檢測、化工分析、環境監測等眾多分析領域。

         

        色譜分析條件

        色譜柱

        Discovery C18柱150mm×4.6mm,Φ5μm

        流動相

        甲醇和水

        柱溫

        30℃

        流速

        1.2mL/min

        進樣量

        10μL

        檢測器

        紫外檢測器

        波長

        280nm

        線性梯度洗脫

        0~35min 98%甲醇和水;35~65min 68%甲醇和水;65~70min 98%甲醇和水。

         

        樣品的制備

        (1)分析樣品的制備:蘋果皮5g(或肉10g),加入1mL 6mol/L的HCl,放置于石英砂中研磨;加50mL的蒸餾水用1 mol/L的HCl調pH至2.0;然后每次加入50mL的乙酸乙酯,萃取兩次,攪拌5min,離心,分離出酯相和水相;將水相用6 mol/L的NaOH調pH至7.0,每次加入50mL的乙酸乙酯萃取2次,分離出酯相。將酯相在30℃下旋轉蒸發,用N2氣吹干,再用1mL的甲醇定容。

        (2)果汁樣品的制備:蘋果汁50.0mL用1 mol/L的HCl調pH至2.0,然后每次加入50mL的乙酸乙酯萃取兩次,攪拌5min,離心,分離出酯相和水相。酯相和水相的處理方法與分析樣品的制備方法一樣。

         

        色譜圖分析:

         酚類物質標準樣品的液相色譜圖

        1—兒茶酚;   2—兒茶素;      3—綠原酸;     4—表兒茶素;

        5—根皮苷;   6—楊梅黃酮;    7—桑色素;     8—槲皮素;

        9—柚苷;     10—山*素;     11—芹菜素

         

        蘋果果肉酚類物質液相色譜圖


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