羥脯-氨酸(HYP)測試盒_氨基酸代謝系列
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意 ： 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
HYP是機體膠原蛋白主要成分之一，膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和血管等，因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項重要指標。
羥脯-氨酸(HYP)測試盒_氨基酸代謝系列
測定原理：
樣品經(jīng)酸水解產(chǎn)生游離的HYP，進一步被氯胺T氧化，氧化產(chǎn)物與對二甲氨基苯-甲醛反應，產(chǎn)生紅色化合物，在560nm處有特征吸收峰。通過測定樣品水解液560nm吸光值，可計算HYP含量。
自備實驗用品及儀器：
天平、烘箱、玻璃管、離心機、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、無水乙醇、異丙醇、6mol/L鹽酸和蒸餾水。
試劑組成和配制：
組織提取液：6mol/L鹽酸，自備。濃鹽酸：H2O（V/V）= 1:1，室溫保存。
細胞提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
羥脯-氨酸提取：
1.組織：稱取約0.5g樣品于玻璃管，加入5mL的組織提取液，置于110℃烘箱，水解6至12小時，用提取液定容至5mL，12000g，25℃，離心20min，取上清待測。
2.細胞：取500萬個細胞，加入2mL的細胞提取液，于高壓消毒器中15磅保持30min，自然降壓后待測。
3.血清游離羥脯-氨酸提取：取0.2mL血清，加入1mL無水乙醇使蛋白質(zhì)沉淀，8000g4℃離心5min。將上清倒入另一個EP管，氮吹或沸水浴將乙醇揮發(fā)干。冷卻后再加入0.4mL50%異丙醇，充分溶解混勻待測。
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