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        上海廣銳生物科技有限公司

        人葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)實驗原理

        時間:2014-6-23閱讀:755
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        人葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)實驗原理

        實驗原理:
        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)水平。用
        純化的人葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的
        微孔中依次加入葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR),再與HRP 標記的葡萄糖激酶調節蛋白
        (GCKRR)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。
        TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣
        品中的葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD
        值),通過標準曲線計算樣品中人葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)含量。

        人葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)實驗原理

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        人葡萄糖激酶調節蛋白(GCKRR)實驗原理

        3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
        4. 配液:將30(48T 的20 倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T 的20 倍)倍稀釋后備用。
        5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
        重復5 次,拍干。
        6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
        7. 溫育:操作同3。
        8. 洗滌:操作同5。
        9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
        15 分鐘.
        10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
        11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止
        液后15 分鐘以內進行。

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