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上海哈靈生物科技有限公司
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冰凍切片神經(jīng)組織金屬鋅蒂姆（TIMM）染色試劑盒產(chǎn)品說明書
2017-10-23 閱讀(1820)
主要用途
冰凍切片神經(jīng)組織金屬鋅蒂姆（TIMM）染色試劑是一種旨在使用蒂姆硫化法銀染技術(shù)，分析存檔中的冰凍組織切片里神經(jīng)系統(tǒng)中含鋅神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良蒂姆（Timm）方法、成功實驗證明的。主要適用于冰凍腦組織或外周神經(jīng)組織切片，例如海馬（hippocampus）中苔蘚纖維區(qū)（mossy fiber region）和齒狀分子層（dentate molecular layer）等含鋅神經(jīng)細(xì)胞體，例如錐體細(xì)胞（pyramidal cells）、齒狀顆粒細(xì)胞（dentate granule cells）等檢測。廣泛用于腦神經(jīng)病理生理，尤其是癲癇等疾病的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。
技術(shù)背景
蒂姆硫化法銀染（Timm’s sulfide silver staining）是由蒂姆建立的用于觀察腦組織和其它組織中（例如胰腺、小腸、腎臟等）微量金屬元素鋅，以及其它重金屬元素，例如銅、鎳、鈷和鐵等的染色技術(shù)。主要用于觀察中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含鋅神經(jīng)元，以及新軸突分枝（sprouted axon）和軸突終端（axon terminal）等結(jié)構(gòu)，分析大腦灰質(zhì)內(nèi)部的海馬中軸突終端（突觸泡囊synaptic vesicle）、苔蘚終端（齒狀顆粒細(xì)胞dentate granule cells）中的反應(yīng)性鋅的分布，與突觸活性和膜去極化的關(guān)系，研究神經(jīng)退行性和癲癇病理性變化機制。其原理在于使用硫化物，與組織中的游離金屬元素反應(yīng)成為不溶性復(fù)合物沉積，進(jìn)而在還原劑的作用下，金屬硫化物催化還原離子銀為可見金屬銀沉積，呈現(xiàn)黑色，即為金屬自顯影術(shù)（autometallography，AMG）。
用戶自備
PBS緩沖液：用于灌注
無離子水：用于組織清洗
1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器
無菌鑷子：用于轉(zhuǎn)移動物腦組織
小型玻璃染色缸：用于組織或切片處理的容器
切片機：用于組織切片
明膠化載玻片和蓋玻片：用于切片后鋪片
中性樹脂：用于切片封片
光學(xué)顯微鏡：用于切片染色后觀察分析
注意事項
1．本產(chǎn)品為10次操作，其中20次染色操作
2．操作時，須戴手套
3．鋪片須使用明膠化載玻片，否則染色會掉片：*用毛筆涂刷；第二保持濕潤3小時；第三用PARAFIN包裹后壓片
4．切片建議10至50微米，過厚和過薄不利于檢測神經(jīng)細(xì)胞
5．注意操作安全，尤其使用固著液（Reagent B和C）
6．建議使用玻璃染色缸
7．每次更換試劑溶液時，保持切片面基本晾干
8．試劑溶液在切片表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面
9．整個操作，在避光狀態(tài)下進(jìn)行
10．染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察
11．樣品染色后保存，避免光照
12．本公司提供系列神經(jīng)系統(tǒng)成分染色試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰
