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PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒
2014-12-11 閱讀(1121)
PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒
產品簡介：
PCR純化試劑盒(PCR Clean Up Kit)，也稱DNA純化試劑盒(DNA Purification Kit)是一種用于PCR產物純化或從多種DNA
反應體系中純化DNA的試劑盒。
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適用于PCR反應后去除引物，酶，礦物油，甘油，鹽等雜質；也同樣適用于酶切，連接，磷酸化，補平或切平，隨機引物等反應后的DNA純化。所得DNA可直接用于酶切，連接，轉化細菌，測序，PCR，雜交等后續操作。
本試劑盒適用于純化100bp-10kb DNA，長至30個堿基的引物均可被*去除。?
本試劑盒采用了一種新型的離子交換柱。在特定條件下，使DNA能在離心過柱的瞬間，結合到DNA純化柱上，在一定條件下又能將DNA充分洗脫，從而實現DNA的快速純化。無需酚氯仿抽提，無需酒精沉淀，12個樣品只需不足15分鐘即可完成。
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每個DNA純化柱可以結合的DNA量的上限約為15微克。
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DNA回收效率約為90%。接近100bp或10kb的DNA片斷回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果樣品中DNA含量特別低也會導致回收效率下降。?
每個試劑盒足夠純化50個平均體積不超過400微升的DNA樣品。
保存條件：
室溫保存，一年有效。
注意事項：?
*次使用前在溶液II
(洗滌液)中加入39ml無水乙醇，混勻，并在瓶上做好標記。
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溶液I對人體有刺激性，操作時請小心，并注意適當防護。
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本試劑盒所有操作均在室溫進行，操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進行。
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廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。
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為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1.加入等體積的溶液I，混勻。
例如如DNA樣品體積為100微升，則加100微升溶液I。如果等體積混合后體積較大，可以把部分樣品加入到純化柱內，經
離心處理后，再加入剩余的樣品繼續處理。礦物油對于本試劑盒沒有干擾。
2.加入到DNA純化柱內，
室溫放置1分鐘。
3.zui高速(16000g，約12000-14000rmp左右)離心1分鐘，倒棄收集管內的液體。
注意：這一步一定要達到16000g，較低離心速度會導致回收效率下降。
4.在DNA純化柱內加入700微升溶液II，室溫放置1分鐘。
5.zui高速離心1分鐘，洗去雜質。倒棄收集管內的液體。
6.再加入500微升溶液II，zui高速離心1分鐘，進一步洗去雜質。倒棄收集管內的液體。
7.zui高速再離心1分鐘，除去殘留液體并讓殘留的乙醇充分揮發。
8.將DNA純化柱置于1.5毫升離心管上，加入30微升溶液III至管內柱面上，放置1分鐘。
用1.5ml離心管作為收集管。溶液III需要直接加至管內柱面中央，使液體被純化柱吸收。如果不慎將溶液III沾在管壁上，
一定要震動管子，使液體滑落到管底，以便被純化柱吸收。也可以用重蒸水或MiliQ級純水替代溶液III，但是水的
pH應不小于6.5。如需得到較高濃度的DNA，可以只加20微升溶液III，但產量會略有下降。放置較長時間例如3-5分鐘，會對提供產量略有幫助。
9. zui高速離心1分鐘，所得液體即為高純度DNA
