產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類(lèi)或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱(chēng)：Human GDF7 Protein, His tag
產(chǎn)品中文名稱(chēng)：重組人生長(zhǎng)分化因子7，His-標(biāo)簽（GDF7）
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號(hào)：EY-01X8700
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):
表達(dá)宿主:大腸桿菌
種屬:人
序列:氨基酸序列來(lái)源于：人GDF7(Thr322-Arg450) (Q7Z4P5) 表達(dá)的蛋白片段。
活性:Testing in progress.
蛋白長(zhǎng)度：重組人BMP15由125個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為14.07KD。
純度:> 95% ，使用SDS-PAGE檢測(cè)
通過(guò)LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。
產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的PBS，pH7.4。
基因ID:151449
使用中注意事項(xiàng):開(kāi)蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦用該產(chǎn)品動(dòng)?動(dòng)
背景
GDF-7 belongs to the TGF-β superfamily of growth and differentiation factors. It is expressed selectively by roof plate cells that are located in the developing embryonic central nervous system, and has been shown to influence the neuronal identity of cells within the central nervous system. GDF-7 has also been implicated in the formation, maintenance, and repair of certain cartilage and ligament tissues.
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原 0.5mgCAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原
HSPA8 Protein Human 重組人 HSPA8 / HSC70 蛋白
FGF18重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 Protein
CDH8 Protein Rat 重組大鼠 Cadherin-8 / CDH8 蛋白
TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein
小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 96T/48T
The rat gasic cancer marker CA199ELISA Kit 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199檢測(cè)試劑盒
HumanCystatinC,Cys-CELISAKit 人半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCompleme1inhibitoraoaibody,C1INH檢測(cè)試劑盒人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織AX1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit人交聯(lián)物(PY)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體檢測(cè)試劑盒 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體檢測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔骨保護(hù)素檢測(cè)試劑盒 兔骨保護(hù)素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔骨保護(hù)素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)動(dòng)?動(dòng)
大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： EGFR ELISA Kit
Mouse alpha hydroxybyrate dehydrogenase (HBDH) ELISA Kit 小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠凋亡相關(guān)因子配體(mouse Fas Ligand) 進(jìn)口分裝
CLIAKitfom-1ELISAKit大鼠腎損傷分子1
通用型蛋白免疫共沉淀(蛋白G樹(shù)脂)試劑盒10次
ELISAKitMHCⅡ/H-1Ⅱ大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)
重組人生長(zhǎng)分化因子7，His-標(biāo)簽（GDF7）FGF18重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 Protein
CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原 0.5mgCAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原
TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein
HSPA8 Protein Human 重組人 HSPA8 / HSC70 蛋白
CDH8 Protein Rat 重組大鼠 Cadherin-8 / CDH8 蛋白
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體
1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。
(四)誘導(dǎo)表達(dá)
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
